中文名:透明質酸酶
外文名:Hyaluronidase
中文別名:羊睪丸等
所屬學科:生物學
常用量:60U~160U溶于生理鹽水
作 用:暫時能降低人體內細胞間質的粘性
透明質酸酶純化方案:透明質酸酶也叫玻璃suan酶。其可以降低組織黏度,提高毛細血管和組織的通透性,加速細胞內外物質的擴散,是一種重要的藥物擴散劑。牛羊睪丸中提取的透明質酸酶與頂體酶混合存在。目前國內提純該酶主要是傳統的鹽析方法,提純純度不高。生物分離介質作為純化技術的新技術和新趨勢,不僅生物相容性好,而且提純精度高,可以達到較好的分離效果。牛羊睪丸中的透明質酸Chemicalbook酶分子量是6.1×104,為酸性蛋白酶,pI<7.0。最適pH值4.0~7.5。頂體蛋白酶是中xin蛋白酶,pI=7.0。可以用DEAEBio-sepFF弱陰離子交換介質進行純化。在pH=7.0時透明質酸酶帶負電荷,頂體蛋白酶不帶電荷。頂體蛋白酶不帶電荷,不被介質吸附,在上樣過程中流穿出來。透明質酸酶帶負電荷被介質吸附,再用高鹽濃度的緩沖液洗脫下來,從而達到兩個酶分離純化的目的。
化學性質:白色或淺黃色絮狀凍干物,無臭,易溶于水,不溶于乙醇、丙酮和yi醚,最適pH值4.5-6.0。穩定性:凍干物于4℃保存一年活力無明顯下降;42℃條件下,加熱60min活力不變;100℃加熱5min保留80%活力;低濃度水溶液易失活,加入NaCl可增加其穩定性;遇熱易變質。抑制劑有重金屬離子(Cu2+、HR<2+、Fe<3+、Mn<2+、Zn<2+)、酸性有機染料、膽鹽、多聚陰離子和高分子量的多聚糖如硫suan軟骨素B、肝素、硫酸乙酰肝素;激活劑為多聚陽離子。1%水溶液在280nm處吸收系數為8。透明質酸酶主要是水解透明質酸中的N-乙酰-β-D-葡糖胺和D-葡糖醛酸之間的β-1,4-鍵,產生四糖殘基,不釋放單糖,酶反應:透明質酸+H2O═寡聚糖。
用途:用于生化研究,臨床上常用于促進手術及創傷后局部水腫或血腫的消散,促進局ma藥的浸潤,減輕注射部位的疼痛,加速皮下、肌肉注射藥液的吸收,也可用于腸粘連。
**方法:以羊睪丸為原料,將乙酸提取液用硫酸銨初步沉淀,經透析后再次用硫酸銨、乙醇分級沉淀,精制后得產品。
DextranSulfate,Na10g/25g/50gAmresco分裝
(硫酸葡聚糖)
Dextransulfatesodiumsalt10g/25g/100g原裝Sigma D8906
(硫酸葡聚糖鈉鹽)
DextranT10/20/40/70/110/10g/100gPharmacia分裝
500/2000
(葡聚糖)
Dextrin100g/500g原裝Sigma D2131
(糊精)
D-Fructose250g/500g/1kg/5kg原裝Amresco 0226
(D-果糖)
D-Fructose-6-phosphateNa2100mg/250mg/1g/5g原裝Sigma F3627
(D-果糖-6-磷酸二鈉)
D-Galactosamine250mg/1g/5gINALCO原裝
(D-氨基半乳糖)
D-Galactose25g/100g/500gINALCO原裝
(D-半乳糖)
D-Galacturonicacid5g/10g/25g原裝Fluka 48280
(D-半乳糖醛酸)
D-GlucosamineHCl10g/25g/500g原裝Sigma G4875
(D-氨基葡萄糖)
D-Glucose-1-PhosphateNa2250mg/1g/5g/25g原裝Sigma G7000
(D-葡萄糖-1-磷酸二鈉)
D-Glucose-6-PhosphateNa2100mg/500mg/1g/5gSigma G7250
(D-葡萄糖-6-磷酸二鈉)
Dicamba1g/5gSigma 523844
(除草劑)