產品介紹
細胞名稱:人胸膜瘤細胞
形態特性:上皮細胞樣
生長特性:貼壁生長
特征特性: SMC-l源自一位病理切片確診為混合型惡性肋膜間皮瘤的43歲患者的切除組織。 這個細胞株的特征是多態性和多層生長,倍增時間約為32小時。 最高的有絲分裂指數為46-50%。 移植到動物中可以生成在組織學上與原發灶類似的腫瘤。
培養條件: RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法:消化3-5分鐘。1:
2。3天內可長滿。
傳代情況: PN
凍存條件:完全培養基+8%DMSO
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.人胸膜瘤細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。