產品介紹
細胞名稱:人淋巴瘤細胞
形態特性:淋巴母細胞樣
生長特性:懸浮生長
特征特性:該細胞來源于一位3歲的白人Burkitt淋巴瘤患者;EBV陰性;表達IL-4受體和低親和性IgE受體(CD23);每個細胞表面大約有1500個IL-4的結合位點;分泌IgM(lamda L);表達膜型和分泌型的免疫球蛋白。
培養條件: RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法:維持細胞濃度在2×105/ml~1×106/ml;根據細胞濃度每2~3天補液1次。
傳代情況:不詳
凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.人淋巴瘤細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。