產(chǎn)品介紹
細(xì)胞名稱：人結(jié)直腸癌細(xì)胞
形態(tài)特性：上皮樣；多角
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
特征特性： T84細(xì)胞來源于一位72歲的男性結(jié)直腸癌患者的肺部轉(zhuǎn)移灶；皮下接種至BALB/c裸鼠并連續(xù)傳代23次后建立該細(xì)胞系。在裸鼠身上傳代的過程中，該腫瘤仍保持原始的結(jié)直腸癌的組織學(xué)特性。T84細(xì)胞系生長(zhǎng)至匯合狀態(tài)時(shí)形成單層細(xì)胞，相鄰細(xì)胞間有緊密連接和細(xì)胞橋粒；該細(xì)胞有多種肽類激素和神經(jīng)遞質(zhì)的受體，維持電解質(zhì)的定向運(yùn)輸；角蛋白陽(yáng)性。
培養(yǎng)條件： DMEM/F12(1:1): Ham＇s F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50%
傳代方法： 1:2~1:4傳代；每周2次。
傳代情況： C5
凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
產(chǎn)品名稱 | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞 |
英文簡(jiǎn)稱 | T84 |
狀態(tài) | 貼壁 |
細(xì)胞冷凍保存：
1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。
細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟：
1.人結(jié)直腸癌細(xì)胞吸走用于培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞；
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
（細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感，消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止，禁止消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。
