產品介紹
細胞名稱:人小細胞肺癌細胞
形態特性:上皮樣
生長特性:懸浮聚集生長
特征特性:該細胞由Gazdar AF及其同事于1979年從一名小細胞肺癌患者的骨髓轉移灶中分離建立,該骨髓標本的獲取先于患者的治療。該細胞是一種典型的小細胞性肺癌細胞,表達較高水平的4種生化標志:
神經特異性烯醇、肌酸激酶腦型同工酶、左旋多巴脫羧酶、鈴蟾肽樣免疫活性。c-myc DNA序列沒有擴增;未發現大的結構DNA的異常;該細胞合成與正常肺相當量的p53 mRNA。該細胞以聚集體的形式懸浮生長,只有聚集體中的細胞是有活力的,但是細胞活率無法估計,一般培養基
傳代方法: 1:
2傳代;5~7天1次。
傳代情況: C5
凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 人小細胞肺癌細胞 |
英文簡稱 | NCI-H209 |
狀態 | 貼壁 |
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.人小細胞肺癌細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。