產品介紹
細胞名稱:人前列腺癌細胞
形態特性:上皮樣;梭形
生長特性:貼壁生長
特征特性:該細胞由Horoszewicz JS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結細針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細胞的生長和酸性磷酸酶的產生。該細胞不形成均一的單層而是成簇生長,所以傳代的時候要反復吹打形成單個細胞;該細胞貼壁不牢,達不到匯合狀態,而且會使培養基迅速變酸;傳代后48h內一定要保持培養瓶靜止.如果此時挪動培養瓶,會使大部分細胞從瓶底脫落。如果出現此種情況,需要重新孵育24
傳代方法: 1:3~1:6傳代;5~7天1次。
傳代情況: P50
凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.人前列腺癌細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。