產品介紹
細胞名稱:SV40轉染人成骨細胞
形態(tài)特性:
生長特性:貼壁生長
特征特性:在0.6mg/ml新霉素G418存在下,用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然流產的胎兒四肢組織,建立了此細胞系。 在許可溫度33.5oC下細胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細胞極少分裂或不分裂。 這些細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力。 這些細胞提供了一個同質化的快速增殖模型系統(tǒng),用于研究正常人造骨細胞的分化,造骨細胞生理和激素,生長因子,和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。
培養(yǎng)條件: DMEM/F12(1:1): H
傳代方法:消化3-5分鐘。1:
2。3天內可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件:完全培養(yǎng)基+8%DMSO
產品名稱 | SV40轉染人成骨細胞 |
英文簡稱 | hFOB1.19 |
狀態(tài) | 貼壁 |
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養(yǎng)的操作步驟:
1.SV40轉染人成骨細胞吸走用于培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài),導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。