SP6 RNA聚合酶

英文名稱：SP6 RNA Polymerase

其他名稱：SP6核糖核酸聚合酶

級(jí)別：BR

分子量：?jiǎn)误w約98kDa

來(lái)源：大腸桿菌細(xì)胞，含有編碼相應(yīng)RNA聚合酶的克隆基因

濃度：20u/ul（≥100U/ul，HC）

活力定義：是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol AMP合成摻入到寡聚核苷酸片段（DE-81)光吸收形式）所需的酶量

酶活性分析混合物：40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亞精胺，0.5mM 各種NTP,0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相應(yīng)啟動(dòng)子序列的質(zhì)粒DNA

保存緩沖：每種聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mMNaC1, 0.5mM ELUGENT去污劑和50%(V/V) 甘油

5×轉(zhuǎn)錄緩沖液：200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亞精胺

抑制劑：金屬螯合劑，當(dāng)NaC1或KC1濃度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶）時(shí)，酶活性降低超過(guò)50%，硫酸銨可使酶活性降低超過(guò)50%

失活：加入EDTA或者70℃加熱10分鐘

質(zhì)量控制：相關(guān)測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染

功能測(cè)試：體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)

特點(diǎn)：合成摻入特殊核苷酸，如氨基-、生物素-、熒光素-、地辛-標(biāo)記的核苷酸

性狀(以下信息僅供參考)：液體,SP6核糖核酸聚合酶是一種依賴DNA的聚合酶，對(duì)SP6啟動(dòng)子序列表現(xiàn)高度專一性。用該酶合成RNA，僅能以SP6 DNA或克隆在SP6 啟動(dòng)下游的DNA作為合成模板。該酶能以32P，35S及3H標(biāo)記的核苷三磷酸為底物

用途：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)合成標(biāo)記和未標(biāo)記的RNA，用于雜交、體外RNA翻譯；作為RNA、siRNA、RNase酶切保護(hù)分析的底物以及基因組DNA測(cè)序的模板；研究RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)和RNA-蛋白質(zhì)相互作用、RNA剪接；標(biāo)記的RNA探針合成，用于印跡實(shí)驗(yàn)、原位雜交、microarray雜交

保存：-20℃