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小腸型脂肪酸結合蛋白(I-FABP)抗體操作步驟

發表時間:2025-03-26 13:18

小腸型脂肪酸結合蛋白(I-FABP)抗體操作步驟如下:

在完成樣本準備后,接下來是I-FABP抗體操作的關鍵步驟。首先,將處理好的樣本小心地加入到已標記有I-FABP抗體的微孔板中。確保每個孔中的樣本量一致,以避免操作誤差。接著,輕輕搖晃微孔板,使樣本與抗體充分混合,并在室溫下靜置孵育一段時間,通常約為30分鐘至1小時,具體時間根據實驗指南或試劑盒說明書確定。

孵育結束后,使用洗滌液仔細清洗微孔板,以去除未結合的樣本成分。洗滌步驟應重復多次,確保徹底清除雜質,避免對后續檢測結果產生干擾。

清洗完畢后,向每個微孔中加入酶標二抗。酶標二抗能與I-FABP抗體結合,形成抗原-抗體-酶標二抗復合物。同樣地,輕輕搖晃微孔板并靜置孵育一段時間。

孵育結束后,再次清洗微孔板,然后加入底物溶液。底物在酶的作用下會發生顯色反應,顏色深淺與I-FABP濃度成正比。在適當的溫度下孵育一段時間后,加入終止液終止顯色反應。

最后,使用酶標儀在特定波長下測定每個微孔的吸光度值。根據標準曲線計算樣本中I-FABP的濃度。記錄并分析數據,得出實驗結果。

在整個操作過程中,應嚴格遵守實驗室安全規范,佩戴適當的個人防護裝備,確保實驗的安全性和準確性。同時,保持實驗環境的整潔和有序,以提高實驗效率。



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