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人增殖誘導配體酶聯免疫試劑盒操作步驟發表時間:2023-08-31 11:34 人增殖誘導配體酶聯免疫試劑盒操作步驟: 1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同) 2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50%l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,然后再加待測樣品 10%l。加樣將樣品加 于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻, 3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。 4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50%l,空白孔除外。 7. 溫育:操作同 3。 8. 洗滌:操作同 5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘. 10. 終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。 APRIL人增殖誘導配體酶聯免疫試劑盒注意事項: 1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。 2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 1530 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未 用完,板條應裝入密封袋中保存。 3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。 4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 5.底物請避光保存。 6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm 7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全。 |
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