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小鼠雜交瘤細胞;HPRT?細胞處理發表時間:2022-04-13 16:10 小鼠雜交瘤細胞;HPRT細胞處理: 1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。 2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。 3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。 4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。 大鼠卵巢顆粒細胞完全培養基 大鼠子宮頸上皮細胞完全培養基 大鼠子宮平滑肌細胞完全培養基 大鼠卵巢上皮細胞完全培養基 大鼠子宮成纖維細胞完全培養基 大鼠卵巢成纖維細胞完全培養基 大鼠腎實質細胞完全培養基 大鼠腎系膜細胞完全培養基 大鼠膀胱上皮細胞完全培養基 大鼠膀胱平滑肌細胞完全培養基 大鼠腎動脈內皮細胞完全培養基 大鼠腎動脈平滑肌細胞完全培養基 大鼠腎小管上皮細胞完全培養基 大鼠腎小球內皮細胞完全培養基 大鼠前列腺上皮細胞完全培養基 大鼠腎上皮細胞完全培養基 大鼠膀胱成纖維細胞完全培養基 大鼠腎足突細胞完全培養基 大鼠腎小管平滑肌細胞完全培養基 大鼠腎成纖維細胞完全培養基 大鼠尿道上皮細胞完全培養基 大鼠輸尿管上皮細胞完全培養基 大鼠腎管狀上皮細胞完全培養基 大鼠心肌細胞完全培養基 大鼠心肌成纖維細胞完全培養基 |
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