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豬主要組織相容性復合體Ⅲ類酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

發(fā)表時間:2022-02-10 13:18

豬主要組織相容性復合體Ⅲ類酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:

1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50%l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40%l,然后再加待測樣品10%l。加樣將樣品加 于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑 50%l,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。


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