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小鼠硒蛋白M(SELM)ELISA試劑盒操作步驟發表時間:2021-12-23 15:41 小鼠硒蛋白M(SELM)ELISA試劑盒操作步驟: 1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。 2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同3。 8. 洗滌:操作同5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。 小鼠白介素-27(mouse IL-27) 小鼠胰島素(mouse Insulin) 小鼠抑制素A(mouse Inhibin A) 小鼠抑制素B(mouse Inhibin B) 小鼠IP-10(mouse IP-10) 小鼠8異前列腺素(mouse 8-iso-PG) 小鼠白三烯B4(mouse LTB4) 小鼠瘦素(mouse Leptin) 小鼠瘦素受體(mouse Leptin receptor) 小鼠促黃體生成激素(mouse LH) 小鼠溶菌酶(mouse Lysozyme) 小鼠巨嗜細胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1) 小鼠MCP-3(mouse MCP-3) 小鼠M-膽堿能受體結合力(mouse MCBC) 小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(mouse MDC) 小鼠髓過氧化物酶(mouse MPO) 小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC) 小鼠肌肉生成抑制素(mouse Myostatin) 小鼠巨噬細胞游走抑制因子(mouse MIF) 小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-1(mouse MIP-1) 小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-2(mouse MIP-2) 小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-3a(mouse MIP-3a) 小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-3β(mouse MIP-3β) 小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-1a(mouse MIP-1a/CCL3) 小鼠基質金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1) 小鼠基質金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2) |
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