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總谷胱甘肽檢測試劑盒實驗中一些常見的問題發(fā)表時間:2020-08-12 16:45 總谷胱甘肽檢測試劑盒實驗中一些常見的問題以及解決方法 問題序號可能原因解決方法顯色淡,靈敏度偏低1 試劑盒未充分平衡試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃) 2 樣品不適合做ELISA檢測樣品一般選擇培養(yǎng)上清、血清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優(yōu)化檢測的條件(例如稀釋液的成分) 3 酶標(biāo)板在貯存或洗后拍干時過分干燥防止板過于干燥 4 包被抗體遭到破壞操作溫和,移液槍不能碰到孔底 5 樣本和抗體孵育條件不合適按照說明書條件,建議孵育過程中全程振蕩孵育。 6 洗滌浸泡時間過長按照說明書操作。勿人為增加浸泡時間; 7 偶聯(lián)HRP試劑污染棄去試劑,重新配置 8 錯誤的稀釋偶聯(lián)HRP試劑棄去試劑,重新配置 9 TMB底物孵育時間過短,因非人為因素影響,需要優(yōu)化孵育時間確定合適的孵育時間:人為判定-最高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品出現(xiàn)深藍色;S4-5有淡藍色;機器判定620 nm波長下測定OD值達到0.6-0.65 10 樣本濃度過高或存在基質(zhì)效應(yīng)建議做不同稀釋倍數(shù),確認樣本最合適的稀釋倍數(shù)。 11 酶標(biāo)儀濾光片設(shè)置有問題或者波長選擇不對確認儀器設(shè)置及選擇正確的波長檢測。 12 酶標(biāo)板不適合做ELISA不能使用細胞培養(yǎng)板,建議使用ELISA專用高吸附力板子。 |
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