最新產品
|
新聞詳情
人前庭鞘膜瘤細胞永生化細胞各項操作步驟發表時間:2020-05-27 14:16 人前庭鞘膜瘤細胞永生化細胞傳代步驟:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 人前庭鞘膜瘤細胞永生化細胞復蘇步驟:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 人前庭鞘膜瘤細胞永生化細胞凍存步驟:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
正品保障 確保所有產品都是原裝正品 | 優質服務 優質服務,售后無憂 | 安全包裝 統一包裝,保障產品安全運輸 | 正規發票 機打發票,附箱送達 |