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PCR試劑盒性質(zhì)闡述發(fā)表時(shí)間:2019-12-26 13:46 PCR試劑盒性質(zhì):又稱基因體外擴(kuò)增技術(shù)或核酸體外擴(kuò)增技術(shù)。利用兩種與相反鏈雜交并利用附著于目標(biāo)DNA兩端的寡核苷酸引物在高溫(95℃)使含目標(biāo)DNA片段的DNA雙鏈變性,分解為單鏈。在較低溫度(37~63℃)與引物退火:然后變溫到72℃左右,在耐高溫DNA聚合物酶作用下引物被沿樣板DNA單鏈延伸合成互補(bǔ)鏈,然后又變性→退火→延伸反復(fù)進(jìn)行。引物大大過(guò)量,dNTP過(guò)量,酶在高溫中是較穩(wěn)定的,這樣經(jīng)過(guò)幾十個(gè)循環(huán),目標(biāo)DNA片段就按2n數(shù)遞增。用此法可從mRNA中,cDNA庫(kù)中擴(kuò)增出目標(biāo)基因。過(guò)去一般合成500~1000bp較好,現(xiàn)已發(fā)展出大片段(75kb)的PCR,且差錯(cuò)甚少。PCR技術(shù)的發(fā)展還可用于定點(diǎn)突變,質(zhì)粒重組及FLP等方面。這一技術(shù)的作用范圍日益擴(kuò)大,已成為分子生物學(xué)工作者基本技術(shù)之一。這項(xiàng)專利技術(shù)1985年由美國(guó)塞特斯(Cetus)公司開(kāi)發(fā)。是20世紀(jì)80年代分子生物學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性突破,已在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、法學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮了極大的作用。 |
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