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新聞詳情

PCR試劑盒性質闡述

發表時間:2019-12-26 13:46

PCR試劑盒性質:又稱基因體外擴增技術或核酸體外擴增技術。利用兩種與相反鏈雜交并利用附著于目標DNA兩端的寡核苷酸引物在高溫(95℃)使含目標DNA片段的DNA雙鏈變性,分解為單鏈。在較低溫度(37~63℃)與引物退火:然后變溫到72℃左右,在耐高溫DNA聚合物酶作用下引物被沿樣板DNA單鏈延伸合成互補鏈,然后又變性→退火→延伸反復進行。QQ截圖20191105143331.jpg引物大大過量,dNTP過量,酶在高溫中是較穩定的,這樣經過幾十個循環,目標DNA片段就按2n數遞增。用此法可從mRNA中,cDNA庫中擴增出目標基因。過去一般合成500~1000bp較好,現已發展出大片段(75kb)的PCR,且差錯甚少。PCR技術的發展還可用于定點突變,質粒重組及FLP等方面。這一技術的作用范圍日益擴大,已成為分子生物學工作者基本技術之一。這項專利技術1985年由美國塞特斯(Cetus)公司開發。是20世紀80年代分子生物學領域中的一項革命性突破,已在分子生物學、醫學、法學等領域發揮了極大的作用。

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