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兔白細胞介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作步驟發表時間:2019-12-25 15:53 兔白細胞介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作步驟 1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl, 然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此 重復5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 7.溫育:操作同3。 8.洗滌:操作同5。 9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 15分鐘. 10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止 液后15分鐘以內進行。
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